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10000× GelRed 核酸染料说明书
产品编号:ST108
产品包装:500ul/支 (10000× GelRed for Prestain Nucleic Acid Dye)
储存条件: 室温12个月;2-8℃避光36个月
一、使用方法:
1、胶染法
(2) 制胶时加入GelRed 核酸染料,每100mL 琼脂糖溶液中加入10μL GelRed 原液。
(2) 按常规方法电泳。 注意事项:
² GelRed 具有良好的热稳定性,可以在热的琼脂糖溶液中直接添加,无需等待溶液冷却,但一定要保证染料充分混匀。也可以将GelRed 储液加到琼脂糖粉末和电泳缓冲液中,然后用微波炉加热制备琼脂糖凝胶。制好的胶溶液可以在室温下保存直至用完。
² GelRed 兼容所有常用的电泳缓冲溶液。
² 如果条带弥散或分离不理想,为了避免染料可能对DNA迁移的干扰,建议使用“泡染法”,如果染色后问题依旧存在,则说明问题与染料无关。
² 此方法不适合预制聚丙烯酰胺凝胶,对于聚丙烯酰胺凝胶请使用泡染法。
2、泡染法
(1)按常规方法进行电泳。
(2)用H2O 将10000×GelRed 储液稀释制成3× 染色液。(例如将15μL 10000×GelRed 储液加入到50mL ddH2O中)。
(3)将凝胶放入合适的容器中,如聚丙烯容器中,缓慢加入足量的3× 染色液浸没凝胶,室温振荡染色30min 左右,最佳染色时间根据凝胶厚度以及琼脂糖浓度不同而略有不同。对于含3.5~10%丙烯酰胺的凝胶,染色时间通常介于30min到1h,并随丙烯酰胺含量增加而延长。注意事项:
² 3× GelRed染色液可以大量制备,在室温下避光保存直至用完。
² 如果使用“泡染法”后,条带仍然弥散或分离不理想,请尝试降低琼脂糖浓度、延长凝胶时间、降低上样量、降低电压以及优化其它电泳条件。
二、GelRed核酸染料特点
安全无毒:独特油性大分子,使其不能穿透细胞膜进入细胞内,艾姆斯氏实验表明,该染料的诱变性远远小于EB。
ü 灵敏度高:超越EB的灵敏度,适用于各种大小片段的电泳染色。
ü 稳定性高: 可以使用微波或其它加热方法制备琼脂糖凝胶;室温下在酸或碱缓冲液中仍然极其稳定。
ü 耐光性强:日常光线下稳定12个月,2-8℃避光可保存36个月。
ü 信噪比好:样品荧光信号强,背景信号低,荧光亮度是EB的十倍以上。
ü 操作简单:操作与EB 一样,在预制胶和电泳过程中染料不降解;而电泳后染色过程也只需20~30 min且无需脱色或冲洗 ,即可直接用紫外凝胶透射仪观察。
ü 适用范围广:可选择电泳前染色(胶染法)或电泳后染色(泡染法);适用于琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶电泳;可用于 dsDNA、ssDNA 或 RNA 染色。
ü 完美兼容:与EB有相同的光谱特性,可使用实验室原有的观察和成像装置,在 302nm 紫外光附近可得到最佳激发。
三、几种核酸染料比较
名称 |
灵敏度 |
稳定性 |
安全性 |
GelRed |
高 |
高 |
独特的油性大分子,不易挥发升华,不易吸 入人体,不能穿透细胞膜进入活体细胞内, 安全无毒。艾姆斯氏测试结果表明,GelRed 在凝胶染色浓度下完全没有诱变性和致癌毒性。 |
EB |
低 |
高 |
分子量小,易挥发升华,易吸入人体,不易生物降解,在体内长期残留。艾姆斯氏实验表明,EB易引起有机体突变,是强诱变剂、高致癌物。 |
Goldview |
低 |
高 |
主要成分为吖啶橙,是一种煤焦油提取物,具有高毒、致癌、高诱变性, 易挥发升华,易吸入人体,能穿透细胞膜进入活体细胞内,不易生物降解,易在体内长期残留。 |
四、相关产品
产品名称 |
货号 |
Sybr Safe 核酸染料(10000 x 水溶液) |
ST-109 |
天能小号水平电泳槽 |
HE-90 |
天能多功能水平电泳槽 |
HE-120 |
天能电源仪 |
EPS-300 |
天能Tanon 1600全自动数码凝胶图像分析系统 |
Tanon 1600 |
天能Tanon5200全自动数码凝胶图像分析系统 |
Tanon 5200 |
西班牙原装琼脂糖100g |
111860 |
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